Expi293表達(dá)培養(yǎng)基的性能

Expi293表達(dá)培養(yǎng)基并不直接兼容ProBond或Ni-NTA純化系統(tǒng)。我們推薦在用His標(biāo)簽的純化操作之前進(jìn)行一次緩沖體系交換或樣本透析。

大多數(shù)293細(xì)胞系均能適應(yīng)從傳統(tǒng)含血清或其它無血清培養(yǎng)基向Expi293表達(dá)培養(yǎng)基中的切換按照手冊中所描述的直接切換法或序貫切換法來操作，大多數(shù)293細(xì)胞系均能適應(yīng)從傳統(tǒng)含血清或其它無血清培養(yǎng)基向Expi293表達(dá)培養(yǎng)基中的切換。 注意：切換后的細(xì)胞可能無法達(dá)到與Expi293F細(xì)胞同等的高水平表達(dá)。

我們推薦使用pcDNA 3.4-TOPO TA載體（貨號A14697）。這一載體含有天然的全長CMV啟動子和克隆位點下游的WPRE（旱獺轉(zhuǎn)錄后調(diào)控元件），這兩個元件均有利于基因的高水平表達(dá)（表達(dá)比pcDNA3.3 TOPO載體高大約2-3倍，而后者又比標(biāo)準(zhǔn)的pcDNA載體高2-5倍）。當(dāng)然，實際表達(dá)水平還要視具體蛋白而定。